Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar www.chinacdoe.com.Tá tacaíocht teoranta CSS ag an leagan brabhsálaí atá in úsáid agat.Chun an taithí is fearr a fháil, molaimid duit brabhsálaí nuashonraithe a úsáid (nó Mód Comhoiriúnachta a dhíchumasú in Internet Explorer).Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, cuirfimid an suíomh gan stíleanna agus JavaScript.
Cuireann córais saotharlainne-ar-sliseanna le cumais ar an láthair an poitéinseal le haghaidh diagnóis thapa agus chruinn agus tá siad úsáideach i suíomhanna atá srianta ó thaobh acmhainní de nuair nach bhfuil trealamh bithleighis agus gairmithe oilte ar fáil.Mar sin féin, is dúshlán mór fós é córas tástála pointe cúraim a chruthú a mbeidh na gnéithe riachtanacha go léir aige ag an am céanna maidir le dáileadh ilfheidhmeach, scaoileadh ar éileamh, feidhmíocht iontaofa, agus stóráil fhadtéarmach imoibrithe.Anseo déanaimid cur síos ar theicneolaíocht lasc taistil micrea-ghníomhaithe lever ar féidir sreabháin a ionramháil i dtreo ar bith, freagra beacht agus comhréireach a sholáthar ar bhrú aeir feidhmeach, agus fanacht cobhsaí i gcoinne gluaiseachtaí tobann agus creathadh.Bunaithe ar an teicneolaíocht, déanaimid cur síos freisin ar fhorbairt chóras imoibrithe slabhra polaiméaráis a chomhtháthaíonn tabhairt isteach imoibrí, meascadh agus feidhmeanna frithghníomhaithe ar fad in aon phróiseas amháin, a chuireann feidhmíocht “sampla-i-freagra” i gcrích do gach sampla sróine cliniciúil ó 18 othar le. Fliú agus 18 rialtán aonair, i gcomhréir mhaith le déine fluaraiseachta le imoibriú caighdeánach slabhra polaiméireáis (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).Bunaithe ar an teicneolaíocht, déanaimid cur síos freisin ar fhorbairt chóras imoibrithe slabhra polaiméaráis a chomhtháthaíonn tabhairt isteach imoibrí, meascadh agus feidhmeanna frithghníomhaithe uile in aon phróiseas amháin, a shlánaíonn feidhmíocht “sampla-i-freagra” do gach sampla sróine cliniciúil ó 18 othar. le Fliú agus 18 rialtán aonair, i gcomhréir mhaith le déine fluaraiseachta le imoibriú caighdeánach slabhra polaiméireáis (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепнео иняет функции введения реагентов, смешивания и реакции в одном процессе, что обеспечивает выполне- le haghaidh an clinishishkikh obrazцov agus le haghaidh an 18ú lá de na Gripp и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресценции со стандартной полкиме (коэффициенты Пирсона > 0,9).Bunaithe ar an teicneolaíocht seo, déanaimid cur síos freisin ar fhorbairt córas imoibrithe slabhra polaiméaráis a chomhcheanglaíonn feidhmeanna instealladh, meascadh, agus imoibriú i bpróiseas amháin, a chumasaíonn sampla-i-freagartha do gach eiseamal sróine cliniciúil ó 18 othar fliú.agus 18 rialtán aonair, ag teacht go maith le déine fluaraiseachta caighdeánach imoibriú slabhrúil polaiméaráis (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).Bunaithe ar an teicneolaíocht seo, déanaimid cur síos freisin ar fhorbairt córas imoibrithe slabhra polaiméaráise a chomhtháthaíonn instealladh imoibrí, meascadh, agus feidhmeanna imoibrithe chun anailís a dhéanamh ar gach eiseamal sróine cliniciúil ó 18 eiseamal othar nasal in-shampla.Influenza agus 18 rialuithe aonair, déine fluaraiseachta comhoiriúnaithe. go maith le imoibriú caighdeánach slabhra polaiméireáis (comhéifeacht Pearson > 0.9).Ráthaíonn an t-ardán atá beartaithe uathoibriú iontaofa anailíse bithleighis agus mar sin féadann sé dlús a chur le tráchtálú raon feistí tástála pointe cúraim.
Is bagairt thromchúiseach do shláinte dhomhanda agus do shibhialtacht dhaonna iad galair dhaonna atá ag teacht chun cinn, amhail an phaindéim COVID-19 2020 a d’éiligh beatha na milliún duine.Tá sé ríthábhachtach galair a bhrath go luath, go tapa agus go cruinn chun scaipeadh an víris a rialú agus chun torthaí cóireála a fheabhsú.Tá croí-éiceachóras diagnóiseach bunaithe ar shaotharlanna láraithe ina seoltar samplaí tástála chuig ospidéil nó clinicí diagnóiseacha agus a reáchtálann gairmithe é ag cur srian le rochtain do bheagnach 5.8 billiún duine ar fud an domhain, go háirithe iad siúd a chónaíonn i suíomhanna atá srianta ó thaobh acmhainní de.i gcás ina bhfuil easpa trealaimh bhithleighis costasach agus speisialtóirí cáilithe.cliniceoirí 2. Mar sin, tá géarghá le córas saotharlainne-ar-sliseanna atá neamhchostasach agus éasca le húsáid a fhorbairt le cumas tástála pointe cúraim (POCT) a fhéadfaidh faisnéis diagnóiseach tráthúil a sholáthar do chliniceoirí chun cinntí eolasacha maidir le diagnóis a dhéanamh. .agus cóireáil 3 .
Luaitear i dtreoirlínte na hEagraíochta Domhanda Sláinte (WHO) gur cheart go mbeadh POCT idéalach ar phraghas réasúnta, so-úsáidte (éasca le húsáid gan mórán oiliúna), cruinn (diúltuithe bréagacha nó dearfacha bréagacha a sheachaint), tapa agus iontaofa (réithe maithe in-atriallachta a sholáthar), agus inseachadta (in ann stóráil fhadtéarmach agus ar fáil go héasca d'úsáideoirí deiridh)4.Chun na ceanglais seo a chomhlíonadh, ní mór do chórais POCT na gnéithe seo a leanas a sholáthar: dáileoga ilúsáide chun idirghabháil láimhe a laghdú, scaoileadh ar éileamh de réir scála le hiompar imoibrí le haghaidh torthaí cruinne tástála, agus feidhmíocht iontaofa chun creathadh comhshaoil a sheasamh.Faoi láthair, is é an gléas POCT is mó a úsáidtear ná an stiall sreafa cliathánach5,6 comhdhéanta de roinnt sraitheanna de seicní nitrocellulose scagach a bhrúnn méid an-bheag sampla ar aghaidh, ag imoibriú le himoibrithe réamh-dhíluailithe trí fhórsa ribeach.Cé go bhfuil buntáiste acu ar chostas íseal, éasca le húsáid, agus torthaí tapa, ní féidir feistí POCT atá bunaithe ar stiallacha sreafa a úsáid ach amháin le haghaidh tástálacha bitheolaíocha (m.sh., tástálacha glúcóis7,8 agus tástálacha toirchis9,10) gan anailísí ilchéime a cheangal.imoibrithe (m.sh. luchtú il-imoibrithe, meascadh, ilphléacsáil).Ina theannta sin, ní sholáthraíonn na fórsaí tiomána a rialaíonn gluaiseacht sreabhán (.i. fórsaí ribeach) comhsheasmhacht maith, go háirithe idir baisceanna, rud a fhágann go mbíonn droch-in-atáirgtheacht11 agus a fhágann go bhfuil bannaí sreafa cliathánach úsáideach go príomha le haghaidh braite maith12,13.
Chruthaigh cumais déantúsaíochta leathnaithe ag an micreascála agus na nana-scála deiseanna chun feistí POCT micreashreabhach a fhorbairt le haghaidh tomhais chainníochtúla14,15,16,17.Trí airíonna an chomhéadain 18, 19 agus céimseata na gcainéal 20, 21, 22 a choigeartú, is féidir fórsa ribeach agus ráta sreafa na bhfeistí seo a rialú.Mar sin féin, tá a n-iontaofacht, go háirithe i gcás leachtanna an-fhliuchaithe, fós do-ghlactha mar gheall ar mhíchruinneas déantúsaíochta, lochtanna ábhartha agus íogaireacht do chreathadh comhshaoil.Ina theannta sin, ós rud é go gcruthaítear sreabhadh ribeach ag an gcomhéadan leachtach-gáis, ní féidir aon sreabhadh breise a thabhairt isteach, go háirithe tar éis an cainéal microfluidic a líonadh le leacht.Dá bhrí sin, le haghaidh braite níos casta, ní mór roinnt céimeanna instealladh samplach a dhéanamh24,25.
I measc feistí microsreabhach, tá feistí lártheifeacha micrea-sreabhach ar cheann de na réitigh is fearr do POCT26,27 faoi láthair.Tá buntáiste ag baint leis an meicníocht tiomána sa mhéid is gur féidir an fórsa tiomána a rialú tríd an luas rothlach a choigeartú.Mar sin féin, is é an míbhuntáiste go bhfuil an fórsa lártheifeacha dírithe i gcónaí i dtreo imeall seachtrach an fheiste, rud a fhágann go bhfuil sé deacair na frithghníomhartha ilchéime a theastaíonn le haghaidh anailísí níos casta a chur i bhfeidhm.Cé go dtugtar isteach fórsaí tiomána breise (m.sh. ribeadáin 28, 29 agus go leor eile 30, 31, 32, 33, 34, 35) sa bhreis ar an bhfórsa lártheifeacha le haghaidh dáileoga ilfheidhmeach, is féidir le haistriú leachtach gan choinne tarlú fós toisc gur orduithe ginearálta iad na fórsaí breise seo. de mhéid níos ísle ná an fórsa lártheifeacha, rud a fhágann nach bhfuil siad éifeachtach ach thar raonta oibriúcháin beaga nó nach bhfuil siad ar fáil ar éileamh le scaoileadh leacht.Tá sé cruthaithe gur rogha tarraingteach eile é ionramhálacha aeroibrithe a ionchorprú i micri-sreabháin lártheifeacha amhail modhanna cinéiteach lártheifeacha 36, 37, 38, modhanna teirmeafópacha 39 agus modhanna gníomhacha aeroibrithe 40.Leis an gcur chuige frithfugodinimiciúil, déantar cuas breise agus micreachainéil nascála a chomhtháthú sa ghléas le haghaidh gníomhaíochta seachtracha agus inmheánacha, cé go bhfuil a éifeachtúlacht caidéalaithe (sa raon ó 75% go 90%) ag brath go mór ar líon na dtimthriallta caidéalaithe agus an slaodacht. den leacht.Sa mhodh teirmeachóip, tá an membrane laitéis agus an seomra aistrithe sreabhach deartha go sonrach chun an t-ionraon a shéaladh nó a athoscailt nuair a théitear nó a fhuaraítear an méid aeir gafa.Mar sin féin, tugann an socrú teasa/fuaraithe isteach fadhbanna mallfhreagartha agus cuireann sé teorainn lena úsáid i dtástálacha teirmeasíogair (eg, aimpliú imoibriú slabhrúil polaiméaráise (PCR).Le cur chuige gníomhach aeroibrithe, baintear amach scaoileadh ar éileamh agus gluaiseacht isteach trí bhrú dearfach a chur i bhfeidhm go comhuaineach agus luasanna rothlacha a mheaitseáil go beacht ag mótair ardluais.Tá cineálacha cur chuige rathúla eile ag baint úsáide as actuators aeroibrithe amháin (brú dearfach 41, 42 nó brú diúltach 43) agus dearaí comhla dúnta de ghnáth.Trí bhrú a chur i bhfeidhm i ndiaidh a chéile sa seomra aeroibrithe, déantar an leacht a phumpáil ar aghaidh go peristaltach, agus cuireann an comhla dúnta de ghnáth cosc ar chúl-shreabhadh an leachta de bharr peristalsis, rud a fhágann gur féidir oibríochtaí casta leachtacha a bhaint amach.Mar sin féin, níl ach líon teoranta teicneolaíochtaí microfluidic ann faoi láthair ar féidir leo oibríochtaí leachtacha casta a dhéanamh i bhfeiste POCT amháin, lena n-áirítear dáileadh ilfheidhmeach, scaoileadh ar éileamh, feidhmíocht iontaofa, stóráil fhadtéarmach, láimhseáil leachtanna ard-slaodachta, agus déantúsaíocht cost-éifeachtach.Gach ag an am céanna.D'fhéadfadh easpa oibríochta feidhmiúil ilchéime a bheith ar cheann de na cúiseanna nach bhfuil ach roinnt táirgí POCT tráchtála mar Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat, agus Rhonda tugtha isteach go rathúil ar an margadh oscailte go dtí seo.
Sa pháipéar seo, molaimid actuator microfluidic aeroibrithe bunaithe ar theicneolaíocht lasc micrea fáinne glas (FAST).Comhcheanglaíonn FAST na hairíonna riachtanacha go léir ag an am céanna le haghaidh raon leathan imoibrithe ó mhicrilítear go millilítear.Is éard atá i FAST ná seicní leaisteacha, luamháin agus bloic.Gan brú aeir a chur i bhfeidhm, is féidir na seicní, na luamháin agus na bloic a dhúnadh go docht agus is féidir an leacht taobh istigh a stóráil ar feadh i bhfad.Nuair a chuirtear brú cuí i bhfeidhm agus a choigeartú go fad an luamháin, leathnaíonn an scairt agus brúnn sé an luamhán go dtí an suíomh oscailte, rud a ligeann don sreabhán dul tríd.Ligeann sé seo méadrú ilfheidhmeach leachtanna ar bhealach easghluaiseachta, comhuaineach, seicheamhach nó roghnach.
Tá córas PCR forbartha againn a úsáideann FAST chun torthaí freagairt-i-sampla a ghiniúint chun víris fliú A agus B (IAV agus IBV) a bhrath.Bhaineamar amach teorainn braite níos ísle (LOD) de 102 cóip/mL, léirigh ár measúnú ilphléacs sainiúlacht don IAV agus IBV agus cheadaigh sé pathotyping víreas fliú.Léiríonn torthaí na dtástálacha cliniciúla a úsáideann an sampla swab sróine ó 18 othar agus 18 duine sláintiúil comhsheasmhacht mhaith i ndéine fluaraiseachta le caighdeán RT-PCR (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).Léiríonn torthaí na dtástálacha cliniciúla a úsáideann an sampla swab sróine ó 18 othar agus 18 duine sláintiúil comhsheasmhacht mhaith i ndéine fluaraiseachta le caighdeán RT-PCR (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).rezulьтаты клинических испытаний сиспользованием образца мазка agus носа от 18 пациентов ипациентов ывают хорошее соответствие интенсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсо9).Léiríonn torthaí na dtrialacha cliniciúla ag baint úsáide as sampla swab nasal ó 18 othar agus 18 duine sláintiúil comhaontú maith idir déine fluaraiseachta RT-PCR caighdeánach (comhéifeachtaí Pearson> 0.9).0.9）。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。 Результаты клинических испытаний сиспользованием образцов назальных мазков от 18 пацицици азали хорошее соответствие между интенсивностью флуоресценции agus стандартной ОТ-ПЦР (коэфон, коэфностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэфон, коэфиџиц)Léirigh torthaí trialacha cliniciúla ag baint úsáide as eiseamail swab sróine ó 18 othar agus 18 duine sláintiúil comhaontú maith idir déine fluaraiseachta agus RT-PCR caighdeánach (comhéifeacht Pearson > 0.9).Is é an costas ábhartha measta a bhaineann le feiste FAST-POCT ná thart ar US$1 (Tábla Forlíontach 1) agus is féidir é a laghdú tuilleadh trí úsáid a bhaint as modhanna déantúsaíochta ar scála mór (eg múnlú insteallta).Go deimhin, tá na gnéithe riachtanacha go léir sainordaithe ag an WHO ag feistí POCT atá bunaithe ar FAST agus tá siad ag luí le modhanna tástála bithcheimiceacha nua cosúil le timthriall teirmeach plasma44, measúnachtaí imdhíonta saor ó aimpliú45 agus tástálacha feidhmiúla nana-duine46 atá mar chnámh droma do chórais POCT.fhéidearthacht.
Ar fig.Léiríonn 1a struchtúr an ardáin FAST-POCT, atá comhdhéanta de cheithre sheomra leachtacha: seomra réamhstórála, seomra meascáin, seomra imoibrithe, agus seomra dramhaíola.Is í an eochair do rialú sreafa sreabhach an dearadh FAST (comhdhéanta de seicní leaisteacha, luamháin agus bloic) atá suite sa seomra réamhstórála agus sa seomra meascáin.Mar mhodh aeroibrithe, soláthraíonn dearadh FAST rialú beacht ar shreabhadh sreabhán, lena n-áirítear lascadh dúnta/oscailte, dáileogacht ilúsáideach, scaoileadh sreabhán ar éileamh, oibriú iontaofa (m.sh. neamhíogaireacht do chreathadh comhshaoil), agus stóráil fhadtéarmach.Tá an t-ardán FAST-POCT comhdhéanta de cheithre shraith: ciseal tacaíochta, ciseal scannán leaisteacha, ciseal scannán plaisteach, agus ciseal clúdaigh, mar a thaispeántar i radharc méadaithe i bhFíor 1b (léirítear go mion freisin i bhFíoracha Forlíontacha S1 agus S2 ).Tá gach cainéal agus seomra iompair sreabhán (cosúil le seomraí réamhstórála agus imoibrithe) leabaithe i bhfoshraitheanna PLA (aigéad polalactic) ó 0.2 mm (an chuid is tanaí) go 5 mm tiubh.Is é an t-ábhar scannáin leaisteacha ná PDMS 300 µm tiubh a leathnaíonn go héasca nuair a chuirtear brú aeir i bhfeidhm mar gheall ar a “thiús tanaí” agus modal íseal leaisteachas (thart ar 2.25 MPa47).Tá an ciseal scannán poileitiléin déanta as terephthalate poileitiléin (PET) le tiús 100 µm chun an scannán leaisteacha a chosaint ó dhífhoirmiú iomarcach de bharr brú aeir.Ag freagairt do na seomraí, tá luamháin ag an gciseal tsubstráit ceangailte leis an gciseal clúdach (déanta as PLA) le insí chun sreabhadh an leachta a rialú.Greamaíodh an scannán leaisteacha den chiseal taca ag baint úsáide as téip ghreamaitheach dhá thaobh (ARseal 90880) agus clúdaíodh é le scannán plaisteach.Cuireadh trí shraith le chéile ar fhoshraith ag baint úsáide as dearadh gearrthóg T sa chiseal clúdaigh.Tá bearna idir dhá chos ag an clamp T.Nuair a cuireadh an gearrthóg isteach sa groove, chrom an dá chos beagán, ansin ar ais chuig a staid bhunaidh agus cheangail siad an clúdach agus an tacaíocht go docht agus iad ag dul tríd an groove (Fíor Forlíontach S1).Ansin cuirtear na ceithre shraith le chéile ag baint úsáide as nascóirí.
Léaráid scéimreach den ardán a thaispeánann urranna feidhmiúla éagsúla agus gnéithe FAST.b Léaráid mhéadaithe den ardán FAST-POCT.c Grianghraf den ardán in aice le bonn ceathrú dollar SAM.
Taispeántar meicníocht oibre an ardáin FAST-POCT i bhFíor 2. Is iad na comhpháirteanna lárnacha na bloic ar an gciseal bonn agus na insí ar an gciseal clúdaigh, rud a fhágann go bhfuil dearadh cur isteach nuair a bhíonn na ceithre shraith le chéile ag baint úsáide as cruth T. .Nuair nach gcuirtear aon bhrú aeir i bhfeidhm (fig. 2a), cuireann an feistiú trasnaíochta ar an hinge lúbadh agus dífhoirmiú, agus cuirtear fórsa séalaithe i bhfeidhm tríd an luamhán chun an scannán leaisteacha a bhrú i gcoinne an bhloc, agus sainmhínítear an leacht sa chuas róin. mar stát séalaithe.Ba chóir a thabhairt faoi deara go bhfuil an luamhán lúbtha amach sa riocht seo, mar a thaispeántar sa taobhchló i bhFíor 2a.Nuair a chuirtear aer ar fáil (Fíor 2b), leathnaíonn an scannán leaisteacha amach i dtreo an chlúdaigh agus brúnn sé an luamhán in airde, rud a fhágann bearna idir an luamhán agus an bloc a oscailt chun sreabhach a shreabhadh isteach sa chéad seomra eile, a shainmhínítear mar staid oscailte. .Tar éis scaoileadh brú aeir, is féidir leis an luamhán filleadh ar a seasamh bunaidh agus fanacht daingean mar gheall ar elasticity an hinge.Cuirtear físeáin de na gluaiseachtaí luamháin i láthair sa scannán forlíontach S1.
A. Léaráid scéimreach agus grianghraif nuair a dúnadh iad.In éagmais brú, brúigh an luamhán an membrane i gcoinne an bhloc, agus tá an leacht séalaithe.b I riocht maith.Nuair a chuirtear brú i bhfeidhm, leathnaíonn an membrane agus cuireann sé an luamhán suas, agus mar sin osclaíonn an cainéal agus is féidir le sreabhach sreabhadh.c Aimsigh sainmhéid an bhrú chriticiúil.I measc na toisí tréithiúla tá fad an luamháin (L), an fad idir an sleamhnán agus an hinge (l) agus tiús an luamháin atá ag brúchtadh (t).Is é Fs an fórsa dhlúthaithe ag pointe an sníomhacháin B. Is é q an t-ualach atá dáilte go haonfhoirmeach ar an luamhán.Seasann Tx* don chasmhóimint arna fhorbairt ag an luamhán insí.Is é brú criticiúil an brú a theastaíonn chun an luamhán a ardú agus an sreabhadh sreabhach a dhéanamh.d Torthaí teoiriciúla agus turgnamhacha ar an ngaol idir brú criticiúil agus méid dúil.n = rinneadh 6 thurgnamh neamhspleách agus taispeántar sonraí mar ± diall caighdeánach.Cuirtear sonraí amh i láthair mar chomhaid sonraí amh.
Forbraíodh múnla anailíse bunaithe ar theoiric an bhíoma chun anailís a dhéanamh ar spleáchas an bhrú chriticiúil Pc ag a n-osclaíonn an bhearna ar na paraiméadair gheoiméadracha (mar shampla, is é L fad an luamháin, is é l an fad idir an bloc agus an). hinge, is é S an luamhán Is é an t-achar teagmhála leis an leacht t ná tiús an luamháin atá ag brúchtadh , mar a thaispeántar i bhFíor 2c).Mar atá sonraithe sna Nótaí Forlíontacha agus i bhFíor Forlíontach S3, osclaíonn an bhearna nuair a bhíonn \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), nuair is é Fs an chasmhóimint \({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) chun deireadh a chur leis na fórsaí a bhaineann le feistiú trasnaíochta agus chun an inse a lúbadh.Léiríonn an freagra turgnamhach agus an tsamhail anailíse comhaontú maith (Fíor 2d), rud a léiríonn go n-ardaíonn an brú criticiúil Pc le t/l ag méadú agus ag laghdú L, rud a mhínítear go héasca ag an tsamhail léas clasaiceach, ie méadaíonn an chasmhóimint le t /Lift .Mar sin, léiríonn ár n-anailís theoiriciúil go soiléir gur féidir an brú criticiúil a rialú go héifeachtach trí fhad an luamháin L agus an cóimheas t/l a choigeartú, rud a sholáthraíonn bunús tábhachtach do dhearadh an ardáin FAST-POCT.
Soláthraíonn an t-ardán FAST-POCT dáileadh ilfheidhmeach (léirithe i bhFíor 3a le inset agus turgnamh), arb é an ghné is tábhachtaí de POCT rathúil, áit ar féidir le sreabhán sreabhadh in aon treo agus in aon ord (cascáid, comhuaineach, seicheamhach) nó ilchainéil roghnach. ag dáileadh .– feidhm dosála.Ar fig.Taispeánann 3a(i) modh dosála cascáideach ina ndéantar dhá sheomra nó níos mó a easghluaiseachta ag baint úsáide as bloic chun na himoibreoirí éagsúla a scaradh agus luamhán chun na staideanna oscailte agus dúnta a rialú.Nuair a chuirtear brú i bhfeidhm, sreabhann an leacht ón seomra uachtarach go dtí an seomra íochtair ar bhealach easghluaiseachta.Ba chóir a thabhairt faoi deara gur féidir na seomraí cascáideacha a líonadh le ceimiceáin fliuch nó le ceimiceáin thirim cosúil le púdair lyophilized.Sa turgnamh in Fíor 3a(i), sreabhann an dúch dearg ón seomra uachtarach in éineacht leis an bpúdar dath gorm (sulfáit chopair) isteach sa dara seomra agus casann sé gorm dorcha nuair a shroicheann sé an seomra íochtair.Taispeánann sé freisin an brú rialaithe don sreabhán atá á phumpáil.Ar an gcaoi chéanna, nuair a bhíonn luamhán amháin ceangailte le dhá sheomra, bíonn sé mar mhodh insteallta comhuaineach, mar a thaispeántar i bhfíor.3a(ii), inar féidir an leacht a dháileadh go haonfhoirmeach ar dhá sheomra nó níos mó nuair a chuirtear brú.Ós rud é go mbraitheann an brú ríthábhachtach ar fhad an luamháin, is féidir fad an luamháin a choigeartú chun patrún insteallta seicheamhach a bhaint amach mar a thaispeántar i bhfíor.3a(iii).Ceanglaíodh luamhán fada (le brú criticiúil Pc_long) le seomra B agus ceanglaíodh luamhán gearr (le brú criticiúil Pc_short > Pc_long) le seomra A. De réir mar a cuireadh brú P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) i bhfeidhm, níor cuireadh ach an leacht i dearg is féidir sreabhadh go dtí seomra B agus nuair a ardaíodh an brú go P2 (> Pc_short), is féidir leis an leacht gorm sreabhadh go dtí seomra A. Baineann an modh instealladh seicheamhach seo le leachtanna éagsúla a aistríonn chuig a ndlísheomraí gaolmhara in ord, rud atá ríthábhachtach le haghaidh POCT rathúil gléas.Ceanglaíodh luamhán fada (le brú criticiúil Pc_long) le seomra B agus ceanglaíodh luamhán gearr (le brú criticiúil Pc_short > Pc_long) le seomra A. De réir mar a cuireadh brú P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) i bhfeidhm, níor cuireadh ach an leacht i dearg is féidir sreabhadh go dtí seomra B agus nuair a ardaíodh an brú go P2 (> Pc_short), is féidir leis an leacht gorm sreabhadh go dtí seomra A. Baineann an modh instealladh seicheamhach seo le leachtanna éagsúla a aistríonn chuig a ndlísheomraí gaolmhara in ord, rud atá ríthábhachtach le haghaidh POCT rathúil gléas.Длинный рычаг (с критическим давлением Pc_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с крикичичечича fada) был соединен с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделеннаяь е компании камеRU B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру A. петое прыска применяется к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие, последовательно перемещаемым в соответствующие кмаюыы Seinn le haghaidh POCT nua.Ceanglaíodh luamhán fada (le brú criticiúil Pc_long) le seomra B, agus ceanglaíodh luamhán gearr (le brú criticiúil Pc_short > Pc_long) le seomra A. Nuair a chuirtear brú P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) i bhfeidhm, níor aibhsíodh ach an leacht is féidir le dearg sreabhadh isteach sa seomra B, agus nuair a mhéadaítear an brú go P2 (> Pc_short), is féidir leis an leacht gorm sreabhadh isteach sa seomra A. Cuirtear an modh instealladh seicheamhach seo i bhfeidhm ar shreabháin éagsúla a aistrítear go seicheamhach chuig na seomraí faoi seach, rud atá ríthábhachtach. le haghaidh POCT rathúil.gléas. Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическлое д caimeo A.Tá an lámh fhada (brú criticiúil Pc_long) ceangailte le seomra B agus tá an lámh ghearr (brú criticiúil Pc_short > Pc_long) ceangailte le seomra A.При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) sa камеру B может поступать только красная жидкость (Pc_long < P1 < Pc_short) sa камеру B может поступать жидкость (Pc_long < P1) Pc_short) в камеру A может поступать синяя жидкость.Nuair a chuirtear brú P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) i bhfeidhm, ní féidir ach le leacht dearg dul isteach i seomra B, agus nuair a mhéadaítear an brú go P2 (> Pc_short), is féidir le leacht gorm dul isteach i seomra A. Tá an modh insteallta seicheamhach seo oiriúnach le haghaidh aistriú seicheamhach de sreabháin éagsúla isteach sna seomraí faoi seach, rud atá ríthábhachtach chun an gléas POCT a oibriú go rathúil.Léiríonn Fíor 3a(iv) an modh roghnaithe insteallta, áit a raibh luamhán gearr (le brú criticiúil Pc_short) agus luamhán fada (le brú criticiúil Pc_long < Pc_short) sa phríomhsheomra a bhí ceangailte le seomra A agus seomra B, faoi seach, ina theannta sin. chuig cainéal aeir eile atá nasctha le seomra B. Chun an leacht a aistriú go seomra A ar dtús, cuireadh brú P1 (Pc_long < Pc_short) agus P2 (P2 > P1) le P1 + P2 > Pc_short ar an ngléas ag an am céanna.Léiríonn Fíor 3a(iv) an modh roghnaithe insteallta, áit a raibh luamhán gearr (le brú criticiúil Pc_short) agus luamhán fada (le brú criticiúil Pc_long < Pc_short) sa phríomhsheomra a bhí ceangailte le seomra A agus seomra B, faoi seach, ina theannta sin. chuig cainéal aeir eile atá nasctha le seomra B. Chun an leacht a aistriú go seomra A ar dtús, cuireadh brú P1 (Pc_long < Pc_short) agus P2 (P2 > P1) le P1 + P2 > Pc_short ar an ngléas ag an am céanna.Ar fig.3а(iv) показан режим селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическлимиы притором рычаг (с критическим давлением Pc_long < Pc_short), которые дополнительно соединялись с камерой A и камесон.Taispeánann 3a(iv) an modh roghnaithe instealladh, ina raibh luamhán gearr (le brú criticiúil Pc_short) agus luamhán fada (le brú criticiúil Pc_long < Pc_short) sa phríomhsheomra, a bhí ceangailte freisin le seomra A agus seomra B, faoi seach.другому воздушному каналу, соединенному самерой B. Чтобы сначала передать жидкость в камерупри A, камерус ывали давление P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) agus P2 (P2 > P1), где P1 + P2 > Pc_short.chuig cainéal aeir eile atá nasctha le seomra B. Chun sreabhán a aistriú go dtí seomra A ar dtús, cuireadh brúnna P1 (Pc_long < Pc_short) agus P2 (P2 > P1) i bhfeidhm go comhuaineach ar an ngléas, áit a raibh P1 + P2 > Pc_short. 3а (iv) показан режим селективного врыска, когаа о с с к к ный с с д д д с с с с с с с . podklyushennomu communate B.Taispeánann 3a(iv) an modh roghnaithe instealladh nuair a bhíonn gas gearr (brú criticiúil Pc_short) agus gas fada (brú criticiúil Pc_long < Pc_short) ceangailte le seomra A agus seomra B faoi seach sa phríomhsheomra, agus i dteannta le haerbhealaigh eile, ceangailte le seomra B.Mar sin, cuireann P2 cosc ar leacht dul isteach i seomra B;Idir an dá linn, sháraigh an brú iomlán P1 + P2 an brú criticiúil chun an luamhán níos giorra ceangailte le seomra A a ghníomhachtú chun an sreabhadh leachtach a cheadú chuig seomra A. Ansin, nuair a bhí gá le seomra B a líonadh, ní mór dúinn ach P1 a chur i bhfeidhm (Pc_long < P1 < Pc_short) sa phríomhsheomra chun an luamhán fada a ghníomhachtú agus ligean don leacht sreabhadh go dtí seomra B. Is féidir a thabhairt faoi deara go soiléir ó am t = 3 s go 9 s gur fhan an leacht i seomra A tairiseach agus é ag méadú sa seomra B nuair a cuireadh brú P1 i bhfeidhm.Idir an dá linn, sháraigh an brú iomlán P1 + P2 an brú criticiúil chun an luamhán níos giorra ceangailte le seomra A a ghníomhachtú chun an sreabhadh leachtach a cheadú chuig seomra A. Ansin, nuair a bhí gá le seomra B a líonadh, ní mór dúinn ach P1 a chur i bhfeidhm (Pc_long < P1 < Pc_short) sa phríomhsheomra chun an luamhán fada a ghníomhachtú agus ligean don leacht sreabhadh go dtí seomra B. Is féidir a thabhairt faoi deara go soiléir ó am t = 3 s go 9 s gur fhan an leacht i seomra A tairiseach agus é ag méadú sa seomra B nuair a cuireadh brú P1 i bhfeidhm.Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать болеке критическое давление, чтобы активировать болеке конон самерой A, чтобы позволить жидкости течь sa камеру A. Затем, когда требуется заполнить камь камонить P1 (Pc_long < P1 < Pc_short ) в основной камере, чтобы активировать длинный рычаг и дать жидкости течь в камеру B. Можо ериод с t = 3 с до 9 с жидкость в камере A оставалась постоянной, в то время как в камере она увеличивалась.Idir an dá linn, sháraigh an brú iomlán P1 + P2 an brú ríthábhachtach chun luamhán níos giorra a ghníomhachtú ceangailte le seomra A chun ligean don leacht sreabhadh isteach i seomra A. Ansin nuair is gá seomra B a líonadh, ní mór dúinn ach P1 a chur i bhfeidhm (Pc_long < P1 < Pc_short ) sa phríomhsheomra chun an luamhán fada a ghníomhachtú agus ligean don leacht sreabhadh isteach i seomra B. Is féidir a thabhairt faoi deara go soiléir gur fhan an leacht i seomra A tairiseach idir t = 3 s agus 9 s, agus gur mhéadaigh sé sa seomra.B nuair a chuirtear brú P1 i bhfeidhm.Ag an am céanna, sáraíonn an brú iomlán P1 + P2 an brú criticiúil, rud a ghníomhaíonn an seomra ceangail luamháin A níos giorra, rud a ligeann do shreabhán sreabhadh isteach sa seomra A.Nuair atá sé in am seomra A a líonadh, ní dhéanaimid ach P1 a chur i bhfeidhm sa phríomhsheomra agus P2 sa seomra tánaisteach.Ar an mbealach seo, is féidir an t-iompar sreabhadh a athrú go roghnach idir ceamaraí A agus B. Is féidir iompar sreabhadh na gceithre mhodh dáileacháin ilfheidhmeacha a fháil sa scannán forlíontach S2.
a Léiriú ar sannadh ilfheidhmeach, ie (i) cascáidiú, (ii) comhuaineach, (iii) seicheamhach, agus (iv) tasc roghnach.Léiríonn na cuair sreabhadh oibre agus paraiméadair na gceithre mhodh dáileacháin seo.b Torthaí tástálacha stórála fadtéarmacha in uisce dí-ianaithe agus eatánól.n = rinneadh 5 thurgnamh neamhspleách agus taispeántar na sonraí mar ± sd c.Taispeántais tástála cobhsaíochta nuair a bhí an fheiste FAST agus an fheiste comhla ribeach (CV) i (i) staideanna statacha agus (ii) creathadh.(iii) Toirt vs. am le haghaidh feistí FAST agus CV ag minicíochtaí uilleacha éagsúla.d Foilsiú torthaí tástála ar éileamh ar (i) feiste FAST agus (ii) feiste CV.(iii) An gaol idir toirt agus am maidir le feistí FAST agus CV a úsáideann modh brú eadrannach.Gach barraí scála, 1 cm.Soláthraítear sonraí amh mar chomhaid sonraí amh.
Gné thábhachtach eile d’fheiste POCT rathúil is ea stóráil fhadtéarmach imoibrithe a ligfidh do phearsanra gan oiliúint il-imoibrithe a láimhseáil.Cé gur léirigh go leor teicneolaíochtaí a n-acmhainneacht stórála fadtéarmach (m.sh., 35 microdispensers, 48 pacáiste blister, agus 49 pacáiste bata), tá urrann glactha tiomnaithe ag teastáil chun freastal ar an bpacáiste, rud a mhéadaíonn costas agus castacht;ina theannta sin, ní cheadaíonn na meicníochtaí stórála seo dáileadh ar éileamh agus cuireann siad amú imoibrithe de bharr fuílleach sa phacáistiú.Fíoraíodh cumas stórála fadtéarmach trí thástáil saoil luathaithe a dhéanamh ag baint úsáide as ábhar PMMA meaisínithe CNC mar gheall ar a gharbh agus a fhriotaíocht ar thréscaoilteacht gáis (Fíor Forlíontach S5).Líonadh an gaireas tástála le huisce dí-ianaithe (uisce dí-ianaithe) agus 70% eatánól (ag ionsamhlú imoibrithe so-ghalaithe) ag 65°C ar feadh 9 lá.Stóráladh uisce dí-ianaithe agus eatánól trí úsáid a bhaint as scragall alúmanaim chun rochtain a chosc ó thuas.Baineadh úsáid as cothromóid Arrhenius agus fuinneamh gníomhachtaithe treá a tuairiscíodh sa litríocht50,51 chun an choibhéis fhíor-ama a ríomh.Ar fig.Léiríonn 3b meántorthaí meáchain caillteanais do 5 shampla arna stóráil ag 65°C ar feadh 9 lá, cothrom le 0.30% d’uisce dí-ianaithe agus 0.72% d’eatánól 70% thar 2 bhliain ag 23°C.
Ar fig.Taispeánann 3c an tástáil creathadh.Ós rud é gurb é an comhla ribeach (CV) an modh láimhseála sreabhach is coitianta i measc na bhfeistí POCT28,29 atá ann cheana féin, baineadh úsáid as feiste CV 300 µm ar leithead agus 200 µm ar doimhneacht chun comparáid a dhéanamh.Is féidir a fheiceáil, nuair a fhanann an dá fheiste ina stad, go n-osclaíonn an sreabhach sna rónta ardán FAST-POCT agus an sreabhach sa fheiste CV mar gheall ar leathnú tobann an chainéil, rud a laghdaíonn fórsaí ribeacha.Mar sin féin, de réir mar a mhéadaíonn minicíocht uilleach an vibrator orbital, tá an sreabhach san ardán FAST-POCT fós séalaithe, ach sreabhann an sreabhach sa fheiste CV isteach sa seomra íochtair (féach freisin Scannán Forlíontach S3).Tugann sé seo le tuiscint gur féidir le insí deformable an ardáin FAST-POCT fórsa láidir meicniúil a chur i bhfeidhm ar an modúl chun an leacht a dhúnadh go docht sa seomra.Mar sin féin, i bhfeistí CV, coinnítear leacht mar gheall ar an gcothromaíocht idir na céimeanna soladacha, aeir agus leachtacha, rud a chruthaíonn éagobhsaíocht, agus is féidir le vibrations an t-iarmhéid a chur isteach agus iompar sreabhadh gan choinne a chur faoi deara.Is é an buntáiste a bhaineann leis an ardán FAST-POCT ná go soláthraíonn sé feidhmiúlacht iontaofa agus go seachnaíonn sé teipeanna i láthair na gcreathadh a tharlaíonn de ghnáth le linn seachadta agus oibríochta.
Gné thábhachtach eile den ardán FAST-POCT ná a scaoileadh ar éileamh, atá ina phríomhriachtanas le haghaidh anailís chainníochtúil.Ar fig.Déanann 3d comparáid idir scaoileadh ar éileamh an ardáin FAST-POCT agus an fheiste CV.Ó fig.3d(iii) feicimid go bhfreagraíonn an gléas FAST go tapa don chomhartha brú.Nuair a cuireadh brú i bhfeidhm ar an ardán FAST-POCT, sreabhadh an sreabhach, nuair a scaoileadh an brú, stop an sreabhadh láithreach (Fíor 3d(i)).Is féidir an gníomh seo a mhíniú trí aischur tapa leaisteach na hinge, a bhrúnn an luamhán ar ais i gcoinne an bhloc, ag dúnadh an seomra.Mar sin féin, lean an sreabhán ag sileadh san fheiste CV, rud a d'fhág go raibh toirt sreabháin de thart ar 100 µl gan choinne i ndiaidh scaoileadh brú (Fíor 3d(ii) agus Scannán Forlíontach S4).Is féidir é seo a mhíniú nuair a imíonn éifeacht feannadh ribeach nuair a fhliuchfar an CV go hiomlán tar éis an chéad insteallta.
Is dúshlán i gcónaí é d’fheidhmchláir POCT an cumas leachtanna de fhliuchtacht agus slaodacht éagsúil a láimhseáil san fheiste chéanna.D'fhéadfadh sceitheadh nó iompar sreafa eile gan choinne a bheith mar thoradh ar dhrochfhliuchtacht sna bealaí, agus is minic go mbíonn gá le trealamh coimhdeach ar nós meascóirí vortex, lártheifneoirí agus scagairí chun leachtanna an-slaodach a ullmhú 52 .Thástáil muid an gaol idir brú criticiúil agus airíonna sreabhán (le raon leathan de fhliuchtacht agus slaodacht).Taispeántar na torthaí i dTábla 1 agus i bhFíseán S5.Is féidir a fheiceáil gur féidir leachtanna de fhliuchtacht agus slaodacht éagsúla a shéaladh sa seomra, agus nuair a chuirtear brú i bhfeidhm, is féidir fiú leachtanna le slaodacht suas le 5500 cP a aistriú chuig an seomra in aice láimhe, rud a fhágann gur féidir samplaí a bhrath ard. slaodacht (ie sputum, sampla an-slaodach a úsáidtear chun galair riospráide a dhiagnóisiú).
Trí na feistí dáileacháin ilfheidhmeacha thuas a chomhcheangal, is féidir raon leathan feistí POCT atá bunaithe ar FAST a fhorbairt.Taispeántar sampla i bhFíor 1. Tá seomra réamhstórála, seomra meascáin, seomra imoibrithe agus seomra dramhaíola sa ghléasra.Is féidir imoibrithe a stóráil sa seomra réamhstórála ar feadh tréimhsí fada ama agus ansin iad a scaoileadh isteach sa seomra meascaithe.Leis an mbrú ceart, is féidir na himoibreoirí measctha a aistriú go roghnach chuig seomra dramhaíola nó chuig seomra imoibrithe.
Toisc gurb é braite PCR an caighdeán óir chun pataiginí cosúil le H1N1 agus COVID-19 a bhrath agus go bhfuil ilchéimeanna frithghníomhaithe i gceist leis, d’úsáideamar an t-ardán FAST-POCT chun PCR a bhrath mar fheidhmchlár.Ar fig.Taispeánann 4 an próiseas tástála PCR ag baint úsáide as an ardán FAST-POCT.Ar dtús, rinneadh an t-imoibrí eluting, an t-imoibrí maighnéadach miocróbán, an tuaslagán níocháin A, agus an tuaslagán níocháin W a phíobáil isteach sna seomraí réamhstórála E, M, W1 agus W2, faoi seach.Léirítear céimeanna an asaithe RNA i bhfíor.4a agus iad seo a leanas: (1) nuair a chuirtear brú P1 (= 0.26 bar) i bhfeidhm, bogtar an sampla isteach sa seomra M agus scaoiltear isteach sa seomra meascáin é.(2) Soláthraítear brú aeir P2 (= 0.12 bar) trí phort A atá ceangailte le bun an tseomra mheascadh.Cé gur léirigh roinnt modhanna meascáin a n-acmhainneacht maidir le leachtanna a mheascadh ar ardáin POCT (m.sh. meascadh serpentine 53, meascadh randamach 54 agus meascán bhaisc 55), níl a n-éifeachtúlacht agus a n-éifeachtacht mheascadh sásúil fós.Glacann sé an modh measctha mboilgeog, ina gcuirtear aer isteach i bun an tseomra mheascadh chun boilgeoga a chruthú sa leacht, agus ina dhiaidh sin is féidir leis an vortex cumhachtach meascadh iomlán a bhaint amach laistigh de soicind.Rinneadh turgnaimh mheasctha mboilgeog agus cuirtear na torthaí i láthair i bhFíor Forlíontach S6.Is féidir a fheiceáil, nuair a chuirtear brú 0.10 barra i bhfeidhm, go dtógann an meascán iomlán thart ar 8 soicind.Trí an brú a mhéadú go dtí 0.20 bar, baintear meascadh iomlán amach i thart ar 2 soicind.Cuirtear modhanna chun éifeachtúlacht meascáin a ríomh i láthair sa rannán Modhanna.(3) Bain úsáid as maighnéad rubidium chun na coirníní a bhaint as, ansin brúigh P3 (= 0.17 bar) trí phort P chun na himoibrithe a bhogadh isteach sa seomra dramhaíola.Ar fig.Taispeánann 4b,c na céimeanna níocháin chun neamhíonachtaí a bhaint as an sampla mar a leanas: (1) Déantar an tuaslagán níocháin A ón seomra W1 a scaoileadh isteach sa seomra brú-mheasctha P1.(2) Ansin déan an próiseas measctha mboilgeog.(3) Aistrítear an tuaslagán níocháin A chuig an seomra leachtach dramhaíola, agus tarraingíonn an maighnéad amach na miocróibíní sa seomra meascáin.Bhí níochán W (Fíor 4c) cosúil le níocháin A (Fíor 4b).Ba chóir a thabhairt faoi deara go ndearnadh gach céim níocháin A agus W faoi dhó.Taispeánann Figiúr 4d na céimeanna elution chun an RNA a mhaolú ó na coirníní;tá na céimeanna réamhrá elution agus meascadh mar an gcéanna leis na céimeanna asaithe agus níocháin RNA a thuairiscítear thuas.De réir mar a aistrítear na himoibrithe elution isteach sa seomra imoibrithe PCR faoi bhrú P3 agus P4 (= 0.23 bar), sroichtear an brú criticiúil chun lámh an tseomra imoibrithe PCR a shéalú.Ar an gcaoi chéanna, cabhraíonn an brú P4 freisin leis an sliocht chuig an seomra dramhaíola a shéaladh.Mar sin, dáileadh na himoibrithe elution go léir go cothrom i measc na gceithre sheomra imoibrithe PCR chun imoibrithe PCR ilphléacs a thionscnamh.Cuirtear an nós imeachta thuas i láthair i Scannán Forlíontach S6.
Sa chéim asaithe RNA, tugtar an sampla isteach sa inlet M agus instealladh isteach sa seomra meascáin mar aon leis an tuaslagán coirníní a stóráiltear roimhe seo.Tar éis na gráinníní a mheascadh agus a bhaint, déantar na himoibrithe a dháileadh isteach sa seomra dramhaíola.céimeanna nigh b agus c, cuir imoibrithe níocháin réamhstóráilte éagsúla isteach sa seomra meascáin, agus tar éis na coirníní a mheascadh agus a bhaint, aistrigh na himoibrithe chuig an seomra leacht dramhaíola.d Céim elution: Tar éis na himoibrithe elution, meascadh agus eastóscadh coirníní a thabhairt isteach, aistrítear na himoibrithe chuig an seomra imoibrithe PCR.Léiríonn na cuair sreabhadh oibre agus paraiméadair ghaolmhara na gcéimeanna éagsúla.Is ionann brú agus an brú a chuirtear trí na seomraí aonair.Is ionann toirt agus toirt an leachta sa seomra meascáin.Tá gach barra scála 1 cm.Soláthraítear sonraí amh mar chomhaid sonraí amh.
Rinneadh nós imeachta tástála PCR agus cuireann Fíor Fhorlíontach S7 próifílí teirmeacha i láthair lena n-áirítear 20 nóiméad d’am trascríobh droim ar ais agus 60 nóiméad d’am rothaíochta teirmeach (95 agus 60 °C), le timthriall teirmeach amháin 90 s (Scannán Forlíontach S7)..Éilíonn FAST-POCT níos lú ama chun timthriall teirmeach amháin (90 soicind) a chríochnú ná mar a bhíonn RT-PCR traidisiúnta (180 soicind le haghaidh timthriall teirmeach amháin).Is féidir é seo a mhíniú tríd an gcóimheas achar dromchla ard le toirt agus táimhe íseal teirmeach an tseomra imoibrithe micrea-PCR.Is é 96.6 mm2 dromchla an tseomra agus is é 25 mm3 an toirt seomra, rud a fhágann go bhfuil an cóimheas idir an dromchla agus an toirt thart ar 3.86.Mar atá le feiceáil i bhFíor Forlíontach S10, tá groove ar an bpainéal ar ais ag limistéar tástála PCR ár n-ardán, rud a fhágann go bhfuil bun an tseomra PCR 200 µm tiubh.Tá eochaircheap leaisteacha seoltacha teirmeach ceangailte le dromchla téimh an rialtóra teochta, rud a chinntíonn teagmháil dhian le cúl an bhosca tástála.Laghdaíonn sé seo táimhe teirmeach an ardáin agus feabhsaíonn sé an éifeachtúlacht téimh/fuaraithe.Le linn rothaíocht theirmeach, leáíonn agus sreabhann an pairifín atá leabaithe san ardán isteach sa seomra imoibrithe PCR, ag gníomhú mar shéalaithe chun galú imoibrí agus éilliú comhshaoil a chosc (féach Scannán Forlíontach S8).
Rinneadh na próisis braite PCR go léir a thuairiscítear thuas a uathoibriú go hiomlán ag baint úsáide as ionstraim FAST-POCT saincheaptha, comhdhéanta d'aonad rialaithe brú cláraithe, aonad eastósctha maighnéadach, aonad rialaithe teochta, agus aonad gabhála agus próiseála comhartha fluaraiseacha.Díol suntais, d'úsáideamar an t-ardán FAST-POCT le haghaidh aonrú RNA agus ansin d'úsáideamar na samplaí RNA a bhaintear le haghaidh imoibrithe PCR ag baint úsáide as an gcóras FAST-POCT agus an córas PCR deisce chun comparáid a dhéanamh.Bhí na torthaí beagnach mar a chéile agus a léirítear i bhFíor Forlíontach S8.Déanann an t-oibreoir tasc simplí: tugann sé an sampla isteach sa M-seomra agus cuireann sé an t-ardán isteach san ionstraim.Bíonn torthaí tástála cainníochtúla ar fáil i gceann thart ar 82 nóiméad.Tá faisnéis mhionsonraithe faoi uirlisí FAST-POCT le fáil san fhigiúr forlíontach.C9, C10 agus C11.
Is feiniméan domhanda coitianta é an fliú de bharr víris fliú A (IAV), B (IBV), C (ICV) agus D (IDV).Díobh seo, tá IAV agus IBV freagrach as na cásanna is déine agus eipidéimí séasúracha, a ionfhabhtaíonn 5-15% de dhaonra an domhain, is cúis le 3-5 milliún cás tromchúiseach agus is cúis le 290,000-650,000 bás gach bliain.Galair riospráide56,57.Tá diagnóis luath ar IAV agus IB riachtanach chun galracht agus an t-ualach eacnamaíoch gaolmhar a laghdú.I measc na dteicnící diagnóiseacha atá ar fáil, meastar gurb é an t-imoibriú slabhra polaiméaráise droim ar ais transcriptase (RT-PCR) an ceann is íogaire, is sainiúla agus is cruinne (>99%)58,59.I measc na dteicnící diagnóiseacha atá ar fáil, meastar gurb é an t-imoibriú slabhra polaiméaráise droim ar ais transcriptase (RT-PCR) an ceann is íogaire, is sainiúla agus is cruinne (>99%)58,59.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптаПзоТих более чувствительной, специфичной и точной (> 99%)58,59.I measc na modhanna diagnóiseacha atá ar fáil, meastar gurb é imoibriú slabhra polaiméaráise droim ar ais transcriptase (RT-PCR) an ceann is íogaire, is sainiúla agus is cruinne (> 99%)58,59. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (Отиптазой) лее чувствительной, специфичной agus точной (>99%)58,59.De na modhanna diagnóiseacha atá ar fáil, meastar gurb é an imoibriú slabhra polaiméaráise tras-traipisise droim ar ais (RT-PCR) an ceann is íogaire, is sainiúla agus is cruinne (>99%)58,59.Mar sin féin, éilíonn modhanna traidisiúnta RT-PCR píbeáil, meascadh, dáileadh agus aistriú sreabhán arís agus arís eile, rud a chuireann teorainn lena n-úsáid ag gairmithe i suíomhanna teoranta ó thaobh acmhainní de.Anseo, baineadh úsáid as an ardán FAST-POCT chun PCR a bhrath IAV agus IBV, faoi seach, chun a dteorainn braite níos ísle (LOD) a fháil.Ina theannta sin, rinneadh IAV agus IBV a ilphléacsáil chun idirdhealú a dhéanamh idir pataitíopaí éagsúla ar fud speiceas, ag soláthar ardán a bhfuil gealladh fúthu d’anailís ghéiniteach agus an cumas an galar a chóireáil go cruinn.
Ar fig.Taispeánann 5a torthaí na tástála HAV PCR ag baint úsáide as 150 µl de RNA víreasach íonaithe mar shampla.Ar fig.Léiríonn 5a(i) gur féidir leis an déine fluaraiseachta (ΔRn) 0.830 a bhaint amach ag tiúchan HAV de 106 cóip/ml, agus nuair a laghdaítear an tiúchan go 102 cóip/ml, is féidir le ΔRn fós 0.365 a bhaint amach, a fhreagraíonn do níos airde ná sin den ghrúpa rialaithe diúltach folamh (0.002), thart ar 100 uair níos airde.Le haghaidh cainníochtú bunaithe ar shé thurgnamh neamhspleácha, gineadh cuar calabrúcháin líneach idir tiúchan loga agus tairseach timthriall (Ct) de IAV (Fíor 5a(ii)), R2 = 0.993, idir 102-106 cóip/mL.Aontaíonn na torthaí go maith le gnáthmhodhanna RT-PCR.Ar fig.Taispeánann 5a(iii) íomhánna fluaraiseacha de thorthaí tástála tar éis 40 timthriall den ardán FAST-POCT.Fuaireamar amach gur féidir leis an ardán FAST-POCT HAV chomh híseal le 102 cóip/ml a bhrath.Mar sin féin, níl luach Ct ag an modh traidisiúnta ag 102 cóip/mL, rud a fhágann gur LOD de thart ar 103 cóip/mL é.Rinneamar hipitéisiú go bhféadfadh sé seo a bheith mar gheall ar éifeachtacht ard an mheascadh mboilgeog.Rinneadh turgnaimh tástála PCR ar IAV RNA íonaithe chun modhanna measctha éagsúla a mheas, lena n-áirítear meascadh croith (modh meascadh céanna le hoibriú traidisiúnta RT-PCR), meascadh vial (an modh seo, 3 s ag barra 0.12) agus gan aon mheascadh mar ghrúpa rialaithe. ..Tá na torthaí le fáil i bhFíor Forlíontach S12.Is féidir a fheiceáil, ag tiúchan RNA níos airde (106 cóip / mL), go bhfuil luachanna Ct na modhanna meascáin éagsúla beagnach mar a chéile agus a bhaineann le meascadh mboilgeog.Nuair a thit an tiúchan RNA go 102 cóip/mL, ní raibh aon luachanna Ct ag an meascán croith agus rialuithe, agus thug an modh meascáin mboilgeog fós luach Ct de 36.9, a bhí faoi bhun na tairsí Ct de 38. Léiríonn na torthaí tréith meascaithe ceannasach vesicles, atá léirithe freisin i litríocht eile, a d'fhéadfadh a mhíniú freisin cén fáth go bhfuil íogaireacht an ardáin FAST-POCT beagán níos airde ná an RT-PCR traidisiúnta.Ar fig.Taispeánann 5b torthaí anailís PCR ar shamplaí RNA IBV íonaithe sa raon ó 101 go 106 cóip/ml.Bhí na torthaí cosúil leis an tástáil IAV, ag baint amach R2 = 0.994 agus LOD de 102 cóip/mL.
anailís PCR ar víreas fliú A (IAV) le tiúchain IAV idir 106 agus 101 cóip/ml ag baint úsáide as maolán TE mar rialú diúltach (NC).(i) Cuar fluaraiseachta fíor-ama.(ii) Cuar calabraithe líneach idir tiúchan logartamach IAV RNA agus tairseach timthrialla (Ct) do FAST agus do mhodhanna traidisiúnta tástála.(iii) Íomhá fluaraiseacha IAV FAST-POCT tar éis 40 timthriall.b, PCR bhrath víreas fliú B (IBV) le (i) speictream fluaraiseachta fíor-ama.(ii) Cuar calabrúcháin líneach agus (iii) íomhá fhluaraiseachta FAST-POCT IBV tar éis 40 timthriall.Ba é an teorainn braite íochtair (LOD) le haghaidh IAV agus IBV ag baint úsáide as an ardán FAST-POCT ná 102 cóip / ml, atá níos ísle ná modhanna traidisiúnta (103 cóip / ml).c Torthaí tástála ilphléacs don IAV agus IBV.Baineadh úsáid as GAPDH mar rialú dearfach agus úsáideadh maolán TE mar rialú diúltach chun éilliú féideartha agus aimpliú cúlra a chosc.Is féidir ceithre chineál samplaí éagsúla a idirdhealú: (1) samplaí diúltacha GAPDH amháin (“IAV-/IBV-”);(2) Ionfhabhtú IAV (“IAV+/IBV-”) le IAV agus GAPDH;(3) Ionfhabhtú IBV (“IAV-/IBV+”) le IBV agus GAPDH;(4) Ionfhabhtú IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) le IAV, IBV agus GAPDH.Seasann an líne poncaithe don líne tairsí.n = rinneadh 6 thurgnamh bitheolaíoch neamhspleách, taispeántar sonraí mar ± diall caighdeánach.Cuirtear sonraí amh i láthair mar chomhaid sonraí amh.
Ar fig.Taispeánann 5c torthaí na tástála ilphléacsála do IAV/IBV.Anseo, úsáideadh víreas lysate mar réiteach samplach in ionad RNA íonaithe, agus cuireadh ceithre primers le haghaidh IAV, IBV, GAPDH (rialú dearfach) agus maolán TE (rialú diúltach) le ceithre sheomra imoibrithe éagsúla den ardán FAST-POCT.Úsáidtear rialuithe dearfacha agus diúltacha anseo chun éilliú féideartha agus feabhsú cúlra a chosc.Roinneadh na tástálacha i gceithre ghrúpa: (1) samplaí GAPDH-diúltacha (“IAV-/IBV-”);(2) IAV-ionfhabhtaithe (“IAV+/IBV-”) i gcoinne IAV agus GAPDH;(3) IBV-.ionfhabhtaithe (“IAV-”) -/IBV+”) IBV agus GAPDH;(4) Ionfhabhtú IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) le IAV, IBV agus GAPDH.Ar fig.Léiríonn 5c, nuair a cuireadh samplaí diúltacha i bhfeidhm, ba é an déine fluaraiseachta ΔRn den seomra rialaithe dearfach ná 0.860, agus bhí an ΔRn de IAV agus IBV cosúil leis an rialú diúltach (0.002).I gcás na ngrúpaí IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ agus IAV+/IBV+, léirigh na ceamaraí IAV/GAPDH, IBV/GAPDH agus IAV/IBV/GAPDH déine fluaraiseachta suntasach, faoi seach, agus léirigh na ceamaraí eile déine fluaraiseachta fiú ag an gcúlra. leibhéal 40 tar éis rothaíocht teirmeach.Ó na tástálacha thuas, léirigh an t-ardán FAST-POCT sainiúlacht den scoth agus thug sé deis dúinn víris fliú éagsúla a phatóipeáil ag an am céanna.
Chun infheidhmeacht chliniciúil FAST-POCT a bhailíochtú, rinneamar tástáil ar 36 eiseamal cliniciúil (eiseamail swab srón) ó othair IB (n=18) agus rialuithe neamh-IB (n=18) (Fíor 6a).Cuirtear faisnéis othair i láthair i dTábla Forlíontach 3. Deimhníodh stádas ionfhabhtaithe IB go neamhspleách agus d'fhormheas Ospidéal Cleamhnaithe Ollscoil Zhejiang (Hangzhou, Zhejiang) an prótacal staidéir.Roinneadh gach sampla othar ina dhá chatagóir.Próiseáladh ceann amháin ag baint úsáide as FAST-POCT agus próiseáladh an ceann eile ag baint úsáide as córas PCR deisce (SLAN-96P, an tSín).Úsáideann an dá mheasúnú na feisteáin íonúcháin agus braite céanna.Ar fig.Léiríonn 6b torthaí FAST-POCT agus PCR trascríobh droim ar ais traidisiúnta (RT-PCR).Rinneamar comparáid idir an déine fluaraiseachta (FAST-POCT) le -log2(Ct), áit arb é Ct an tairseach timthriall do RT-PCR traidisiúnta.Bhí comhaontú maith idir an dá mhodh.Léirigh FAST-POCT agus RT-PCR comhghaol dearfach láidir le luach cóimheas Pearson (r) de 0.90 (Fíor 6b).Rinneamar measúnú ansin ar chruinneas diagnóiseach FAST-POCT.Soláthraíodh dáiltí déine fluaraiseachta (FL) do shamplaí dearfacha agus diúltacha mar bheart anailíseach neamhspleách (Fíor 6c).Bhí luachanna FL i bhfad níos airde in othair IB ná i rialuithe (****P = 3.31 × 10-19; dhá-tailed t-tástáil) (Fíor 6d).Ansin, breacadh cuair saintréithe oibriúcháin glacadóra IBV (ROC).Fuaireamar amach go raibh an cruinneas diagnóiseach an-mhaith, agus achar faoi chuar 1 (Fíor 6e).Tabhair faoi deara, le do thoil, mar gheall ar ordú masc éigeantach sa tSín mar gheall ar COVID-19 ó 2020, nach bhfuil othair le IBD sainaitheanta againn, agus mar sin bhí na heiseamail chliniciúil dearfacha go léir (ie, eiseamail swab sróine) le haghaidh IBV amháin.
Dearadh staidéar cliniciúil.Rinneadh anailís ar 36 sampla san iomlán, lena n-áirítear 18 sampla othar agus 18 rialú neamh-fhliú, ag baint úsáide as an ardán FAST-POCT agus RT-PCR traidisiúnta.b Déan measúnú ar an gcomhsheasmhacht anailíseach idir FAST-POCT PCR agus RT-PCR traidisiúnta.Comhghaolaíodh na torthaí go dearfach (Pearson r = 0.90).c Leibhéil déine fhluaraiseachta in 18 othar IB agus 18 rialtán.d In othair IB (+), bhí luachanna FL i bhfad níos airde ná sa ghrúpa rialaithe (-) (****P = 3.31 × 10-19; dhá-tailed t-tástáil; n = 36).I gcás gach ceap cearnach, is ionann an marcóir dubh sa lár agus an t-airmheán, agus is ionann línte bun agus barr an bhosca agus an 25ú agus 75ú peircintíl, faoi seach.Síneann na guairí go dtí na pointí sonraí íosta agus uasta, nach meastar gur asluiteach iad.e cuar ROC.Léiríonn an líne poncaithe d an luach tairsí a mheastar ón anailís ROC.Is é an AUC le haghaidh IBV ná 1. Soláthraítear sonraí amh mar chomhaid sonraí amh.
San Airteagal seo, cuirimid i láthair FAST, a bhfuil na tréithe atá ag teastáil le haghaidh POCT idéalach.Áirítear ar na buntáistí a bhaineann lenár dteicneolaíocht: (1) Dáileadh ilghnéitheach (cascáideach, comhuaineach, seicheamhach agus roghnach), scaoileadh ar éileamh (scaoileadh tapa agus comhréireach brú feidhmeach) agus oibriú iontaofa (creathadh ag 150 céim) (2) stóráil fhadtéarmach. (2 bhliain de thástáil luathaithe, meáchain caillteanas thart ar 0.3%);(3) an cumas oibriú le leachtanna le raon leathan de fhliuchtacht agus slaodacht (slaodacht suas le 5500 cP);(4) Eacnamaíoch (Is ionann costas ábhartha measta na feiste FAST-POCT PCR agus thart ar US$1).Trí dáileoirí ilfheidhmeacha a chomhcheangal, léiríodh agus cuireadh ardán FAST-POCT comhtháite chun PCR a bhrath ar víris fliú A agus B.Ní thógann FAST-POCT ach 82 nóiméad.Léirigh na tástálacha cliniciúla le 36 sampla swab sróine comhréir mhaith i ndéine fluaraiseachta le caighdeán RT-PCR (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).Léirigh na tástálacha cliniciúla le 36 sampla swab sróine comhréir mhaith i ndéine fluaraiseachta le caighdeán RT-PCR (comhéifeachtaí Pearson > 0.9).Клинические тесты с 36 образцами мазков agus носа показали хорошее соответствие интенсивностии ПЦР (коэффициенты Пирсона > 0,9).Léirigh tástálacha cliniciúla le 36 sampla de táithíní sróine comhaontú maith le déine fluaraiseachta an RT-PCR caighdeánach (comhéifeachtaí Pearson > 0.9). RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков agus носа показали хорошее совпадение интенсивности флусания ПЦР (коэффициент Пирсона > 0,9).Léirigh tástáil chliniciúil ar 36 eiseamal swab sróine comhaontú maith maidir le déine fluaraiseachta le RT-PCR caighdeánach (comhéifeacht Pearson > 0.9).Ag an am céanna leis an obair seo, léirigh modhanna bithcheimiceacha éagsúla atá ag teacht chun cinn (m.sh., timthriall teirmeach plasma, measúnachtaí imdhíonachta saor ó aimpliú, agus measúnachtaí feidhmiúla nana-duine) a n-acmhainneacht i POCT.Mar sin féin, mar gheall ar an easpa ardán POCT atá lán-chomhtháite agus láidir, tá nósanna imeachta réamhphróiseála ar leith de dhíth ar na modhanna seo (m.sh., leithlisiú RNA44, goir45 agus níocháin46), a chomhlánaíonn tuilleadh an obair reatha leis na modhanna seo chun ardfheidhmeanna POCT a chur i bhfeidhm le. na paraiméadair riachtanacha.feidhmíocht beir-i-freagra-aschuir.San obair seo, cé go bhfuil an caidéal aeir a úsáidtear chun an comhla FAST a ghníomhachtú beag go leor chun a chomhtháthú in ionstraim benchtop (Fíor S9, S10), ídíonn sé cumhacht suntasach fós agus gineann sé torann.I bprionsabal, is féidir modhanna eile a chur in ionad caidéil aeir fachtóir foirm níos lú, mar shampla fórsa leictreamaighnéadach nó gníomhú méar a úsáid.D’fhéadfadh go n-áireodh feabhsuithe breise, mar shampla, feisteáin a oiriúnú do thástálacha bithcheimiceacha éagsúla agus sonracha, úsáid a bhaint as modhanna braite nua nach bhfuil córais téimh/fuaraithe ag teastáil uathu, agus mar sin ardán POCT saor ó uirlisí a sholáthar d’fheidhmchláir PCR.Creidimid, ós rud é go soláthraíonn an t-ardán FAST bealach chun leachtanna a ionramháil, creidimid go bhfuil an cumas ag an teicneolaíocht FAST atá beartaithe ardán coiteann a chruthú, ní hamháin le haghaidh tástála bithleighis, ach freisin le haghaidh monatóireachta comhshaoil, tástáil cáilíochta bia, sintéis ábhar agus drugaí. ..
Tá bailiú agus úsáid eiseamail swab sróine daonna ceadaithe ag Coiste Eitice an Chéad Ospidéal Cleamhnaithe Ollscoil Zhejiang (IIT20220330B).Bailíodh 36 sampla swab sróine, ina raibh 16 duine fásta < 30 bliain d'aois, 7 duine fásta > 40 bliain d'aois, agus 19 fear, 17 baineannach.Bailíodh 36 sampla swab sróine, ina raibh 16 duine fásta < 30 bliain d'aois, 7 duine fásta > 40 bliain d'aois, agus 19 fear, 17 baineannach.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 влы 4 , 7 влы 4 Jin agus 17 Jinn.Bailíodh tríocha sé eiseamal swab sróine ó 16 duine fásta < 30 bliain d'aois, 7 duine fásta os cionn 40 bliain d'aois, 19 fear agus 17 bean.Cuirtear sonraí déimeagrafacha i láthair i dTábla Forlíontach 3. Fuarthas toiliú feasach ó na rannpháirtithe go léir.Bhí amhras ar na rannpháirtithe go léir go raibh fliú orthu agus tástáladh iad go deonach gan chúiteamh.
Tá an bonn agus an clúdach FAST déanta d'aigéad polalactic (PLA) agus clóite ag printéir Ender 3 Pro 3D (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.).Ceannaíodh téip dhá thaobh ó Adhesives Research, Inc. Model 90880. Ceannaíodh scannán PET 100 µm ar tiús ó McMaster-Carr.Gearradh an greamachán agus an scannán PET araon ag baint úsáide as an gearrthóir scáthchruth Cameo 2 ó Silhouette America, Inc. Déantar an scannán leaisteacha d'ábhar PDMS trí mhúnlú insteallta.Ar dtús, gearradh fráma PET 200 µm tiubh ag baint úsáide as córas léasair agus greamaíodh é ar bhileog PMMA 3 mm tiubh ag baint úsáide as téip ghreamaitheach dhá thaobh 100 µm.Doirteadh an réamhtheachtaí PDMS (Sylgard 184; Cuid A: Cuid B = 10:1, Dow Corning) isteach sa mhúnla ansin agus úsáideadh slat ghloine chun barraíocht PDMS a bhaint.Tar éis é a leigheas ag 70 ° C. ar feadh 3 huaire, d'fhéadfaí an scannán PDMS 300 μm tiubh a scafa den mhúnla.
Tógtar grianghraif le dáileadh ilúsáideach, le foilsiú ar éileamh agus le feidhmíocht iontaofa le ceamara ardluais (Sony AX700 1000 fps).Ceannaíodh an croiteoir fithiseach a úsáideadh sa tástáil iontaofachta ó SCILOGEX (SCI-O180).Gineann comhbhrúiteoir aeir an brú aeir, agus úsáidtear roinnt rialtóirí brú cruinneas digiteacha chun an luach brú a choigeartú.Seo a leanas an próiseas tástála iompraíochta sreafa.Instealladh méid sreabhán réamhshocraithe isteach sa ghléas tástála agus baineadh úsáid as ceamara ardluais chun an t-iompar sreafa a thaifeadadh.Tógadh íomhánna fós ó fhíseáin den iompar sreafa ag amanna seasta, agus ríomhadh an limistéar a bhí fágtha ag baint úsáide as bogearraí Image-Pro Plus, a iolraíodh ansin faoi dhoimhneacht an cheamara chun an toirt a ríomh.Is féidir sonraí an chórais tástála iompraíochta sreafa a fháil i bhFíor Forlíontach S4.
Instealladh 50 µl de mhiocrónóga agus 100 µl uisce dí-ianaithe isteach sa ghléas meascaithe vial.Tógadh grianghraif feidhmíochta measctha le ceamara ardluais gach 0.1 soicind ag brúnna 0.1 bar, 0.15 bar agus 0.2 bar.Is féidir faisnéis picteilíní le linn an phróisis chumaisc a fháil ó na híomhánna seo trí úsáid a bhaint as bogearraí próiseála grianghraf (Photoshop CS6).Agus is féidir éifeachtúlacht mheascadh a bhaint amach leis an gcothromóid 53 seo a leanas.
nuair is í M an éifeachtúlacht mheasctha, is é N líon iomlán na bpicteilín samplacha, agus is iad ci agus \(\bar{c}\) na tiúchain normalaithe agus na comhchruinnithe normalaithe a bhfuiltear ag súil leo.Raonta éifeachtúlachta meascadh ó 0 (0%, neamh-mheasctha) go 1 (100%, measctha go hiomlán).Taispeántar na torthaí i bhFíor Forlíontach S6.
Trealamh RT-PCR fíor-ama le haghaidh IAV agus IBV, lena n-áirítear samplaí IAV agus IBV RNA (cat. uimh. RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, an tSín), maolán Tris-EDTA (uimhir maoláin TE B541019 , Sangon Biotech, an tSín), Rialú Dearfach RNA Purification Kit (Cuid Uimh. Z-ME-0010, Liferiver, an tSín) agus GAPDH Réiteach (Cuid Uimh. M591101, Sangon Biotech, an tSín) ar fáil go tráchtála.Cuimsíonn an trealamh íonú RNA maolán ceangailteach, nigh A, nigh W, eluent, miocróníní maighnéadacha, agus iompróir aicrileach.I measc feisteáin RT-PCR fíor-ama IAV agus IBV tá meascán braite PCR aigéad núicléach IFVA agus einsím RT-PCR.Cuir 6 µl Iompróir Aicril agus 20 µl de choirníní maighnéadacha le 500 µl de thuaslagán maolánach ceangailteach, croith go maith agus ansin ullmhaigh an tuaslagán coirníní.Cuir 21 ml d’eatánól le níochán A agus W, croith go maith chun tuaslagáin de níochán A agus W a fháil, faoi seach.Ansin, cuireadh 18 µl de mheascán fluaraiseacha PCR le haigéad núicléach IFVA agus 1 µl d’einsím RT-PCR le 1 µl de thuaslagán TE, croitheadh agus lártheifneoirithe ar feadh roinnt soicind, ag fáil 20 µl de primers IAV agus IBV.
Lean an nós imeachta íonú RNA seo a leanas: (1) asaithe RNA.Pípéad 526 µl den tuaslagán millíní isteach i bhfeadán lártheifneora 1.5 ml agus cuir 150 µl sampla leis, ansin croith an feadán de láimh suas agus síos 10 n-uaire.Aistrigh 676 µl den mheascán go dtí an colún cleamhnais agus cuir lártheifneoir ag 1.88 x 104 g ar feadh 60 soicind.Caithtear amach na draenacha ina dhiaidh sin.(2) An chéad chéim níocháin.Cuir 500 µl de thuaslagán níocháin A leis an gcolún cleamhnais, lártheifneoir ag 1.88 x 104 g ar feadh 40 s, agus caith an tuaslagán caite.Rinneadh an próiseas níocháin seo arís agus arís eile faoi dhó.(3) an dara céim níocháin.Cuir 500 µl de thuaslagán níocháin W leis an gcolún cleamhnais, lártheifneoir ag 1.88 × 104 g ar feadh 15 s agus caith an tuaslagán caite.Rinneadh an próiseas níocháin seo arís agus arís eile faoi dhó.(4) Elution.Cuir 200 µl eluate leis an gcolún cleamhnais agus lártheifneoir ag 1.88 x 104 g ar feadh 2 nóiméad.(5) RT-PCR: Cuireadh an eluate isteach i 20 μl den réiteach primer i bhfeadán PCR, ansin cuireadh an feadán i bhfearas tástála PCR fíor-ama (SLAN-96P) chun an próiseas RT-PCR a dhéanamh.Tógann an próiseas braite ar fad thart ar 140 nóiméad (20 nóiméad le haghaidh íonú RNA agus 120 nóiméad le haghaidh PCR a bhrath).
Cuireadh 526 µl de thuaslagán coirníní, 1000 µl de thuaslagán níocháin A, 1000 µl de thuaslagán níocháin W, 200 µl de thuaslagán eluate agus 20 µl de thuaslagán primer leis agus stóráiltear iad i seomraí braite M, W1, W2, E agus PCR.Tionól ardáin.Ansin, píobánaíodh 150 µl den sampla isteach i seomra M agus cuireadh an t-ardán FAST-POCT isteach san ionstraim tástála a thaispeántar i bhFíor Forlíontach S9.Tar éis thart ar 82 nóiméad, bhí na torthaí tástála ar fáil.
Mura dtugtar a mhalairt le fios, cuirtear na torthaí tástála ar fad i láthair mar mheán ± SD tar éis sé mhacasamhlú ar a laghad ag baint úsáide as an ardán FAST-POCT amháin agus samplaí atá neamhspleách ó thaobh na bitheolaíochta de.Níor fágadh aon sonraí as an áireamh san anailís.Níl na turgnaimh randamach.Ní raibh na taighdeoirí dall ar thascanna grúpa le linn an turgnaimh.
Le haghaidh tuilleadh eolais ar dhearadh an staidéir, féach ar an Tuarascáil Taighde Dúlra achomair atá nasctha leis an alt seo.
Tá sonraí a thacaíonn le torthaí an staidéir seo ar fáil san Fhaisnéis Bhreise.Soláthraíonn an t-alt seo na sonraí bunaidh.
Cuirfidh teanndáileoga Chagla, Z. & Madhukar, P. COVID-19 i náisiúin shaibhre moill ar vacsaíní do chách.Cuirfidh teanndáileoga Chagla, Z. & Madhukar, P. COVID-19 i náisiúin shaibhre moill ar vacsaíní do chách.Cuirfidh teanndáileoga Chagla, Z. agus Madhukar, P. COVID-19 i dtíortha saibhre moill ar vacsaíní do gach duine.Cuirfidh athvacsaíniú Chagla, Z. agus Madhukar, P. COVID-19 i dtíortha saibhre moill ar vacsaíniú do gach duine.Leigheas náisiúnta.27, 1659–1665 (2021).
Faust, L. et al.Tástáil SARS-CoV-2 i dtíortha ísealioncaim agus meánioncaim: infhaighteacht agus inacmhainneacht san earnáil chúram sláinte príobháideach.ionfhabhtú miocróbach.22, 511–514 (2020).
An Eagraíocht Dhomhanda Sláinte.Leitheadúlacht domhanda agus minicíocht na n-ionfhabhtuithe gnéas-tarchurtha leigheasaithe roghnaithe: athbhreithniú agus meastacháin.An Ghinéiv: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Fenton, EM et al.Stiallacha tástála sreabhadh taobh múnlaithe 2D iolrach.Feidhmchlár ASS.alma mater.Idir Milan.1, 124–129 (2009).
Schilling, KM et al.Gléas anailíse páipéar-bhunaithe microfluidic atá faoi iamh go hiomlán.anas.Ceimiceach.84, 1579–1585 (2012).
Lapenter, N. et al.Ceadaíonn imdhíoncrómatagrafaíocht páipéar-bhunaithe iomaíoch in éineacht le leictreoidí einsím-mhodhnaithe monatóireacht gan sreang agus cinneadh leictriceimiceach a dhéanamh ar choitinín fuail.Braiteoirí 21, 1659 (2021).
Zhu, X. et al.Bithmharcóirí galair a chainníochtú le ardán sreabhán cliathánach lán-chomhtháite nana-chomhtháite ag baint úsáide as glucometer.braiteoir bitheolaíoch.Bithleictreonaic.126, 690–696 (2019).
Boo, S. et al.Stiall tástála toirchis chun baictéir phataigineacha a bhrath ag baint úsáide as nana-bhláthanna hibrideacha gonadotropin chorionic A-daonna-Cu3(PO4)2 concanavalin, scaradh maighnéadach agus léamh gutháin chliste.Micrearíomhaire.Irisleabhar.185, 464 (2018).